Pure Saposhnikovia divaricata oil para sa paggawa ng kandila at sabon na wholesale diffuser essential oil bago para sa reed burner diffusers
maikling paglalarawan:
2.1. Paghahanda ng SDE
Ang mga rhizome ng SD ay binili bilang isang tuyong damo mula sa Hanherb Co. (Guri, Korea). Ang mga materyales ng halaman ay kinumpirma ayon sa taxonomic ni Dr. Go-Ya Choi ng Korea Institute of Oriental Medicine (KIOM). Isang voucher specimen (numero 2014 SDE-6) ang idineposito sa Korean Herbarium of Standard Herbal Resources. Ang mga pinatuyong rhizome ng SD (320 g) ay nakuha nang dalawang beses na may 70% na ethanol (na may 2 h reflux) at ang katas ay pagkatapos ay puro sa ilalim ng pinababang presyon. Ang decoction ay sinala, lyophilized, at naka-imbak sa 4 ° C. Ang ani ng pinatuyong katas mula sa mga crude na panimulang materyales ay 48.13% (w/w).
2.2. Pagsusuri ng Quantitative High-Performance Liquid Chromatography (HPLC).
Ang pagsusuri ng Chromatographic ay isinagawa gamit ang isang HPLC system (Waters Co., Milford, MA, USA) at isang photodiode array detector. Para sa pagsusuri ng HPLC ng SDE, ang prim-O-glucosylcimifugin standard ay binili mula sa Korea Promotion Institute for Traditional Medicine Industry (Gyeongsan, Korea), atsec-O-glucosylhamaudol at 4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol ay nakahiwalay sa loob ng aming laboratoryo at kinilala ng mga spectral na pagsusuri, pangunahin ng NMR at MS.
Ang mga sample ng SDE (0.1 mg) ay natunaw sa 70% ethanol (10 mL). Ang Chromatographic separation ay isinagawa gamit ang XSelect HSS T3 C18 column (4.6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). Ang mobile phase ay binubuo ng acetonitrile (A) at 0.1% acetic acid sa tubig (B) sa isang flow-rate na 1.0 mL/min. Ginamit ang isang multistep gradient program tulad ng sumusunod: 5% A (0 min), 5–20% A (0–10 min), 20% A (10–23 min), at 20–65% A (23–40 min). ). Ang wavelength ng pagtuklas ay na-scan sa 210-400 nm at naitala sa 254 nm. Ang dami ng iniksyon ay 10.0μL. Ang mga karaniwang solusyon para sa pagpapasiya ng tatlong chromone ay inihanda sa isang panghuling konsentrasyon na 7.781 mg/mL (prim-O-glucosylcimifugin), 31.125 mg/mL (4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol), at 31.125 mg/mL (sec-O-glucosylhamaudol) sa methanol at pinananatili sa 4°C.
2.3. Pagsusuri ng Anti-Inflammatory ActivitySa Vitro
2.3.1. Kultura ng Cell at Sample na Paggamot
Ang RAW 264.7 na mga cell ay nakuha mula sa American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) at lumaki sa DMEM medium na naglalaman ng 1% antibiotics at 5.5% FBS. Ang mga cell ay incubated sa isang humidified na kapaligiran ng 5% CO2 sa 37 ° C. Upang pasiglahin ang mga cell, ang medium ay pinalitan ng sariwang DMEM medium, at lipopolysaccharide (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) sa 1μAng g/mL ay idinagdag sa pagkakaroon o kawalan ng SDE (200 o 400μg/mL) para sa karagdagang 24 na oras.
2.3.2. Pagpapasiya ng Nitric Oxide (NO), Prostaglandin E2 (PGE2), Tumor Necrosis Factor-α(TNF-α), at Interleukin-6 (IL-6) Production
Ang mga cell ay ginagamot ng SDE at pinasigla ng LPS sa loob ng 24 na oras. WALANG produksiyon ang nasuri sa pamamagitan ng pagsukat ng nitrite gamit ang Griess reagent ayon sa isang nakaraang pag-aaral [12]. Ang pagtatago ng mga nagpapaalab na cytokine na PGE2, TNF-α, at ang IL-6 ay natukoy gamit ang isang ELISA kit (R&D system) ayon sa mga tagubilin ng tagagawa. Ang mga epekto ng SDE sa NO at produksyon ng cytokine ay natukoy sa 540 nm o 450 nm gamit ang isang Wallac EnVision™microplate reader (PerkinElmer).
2.4. Pagsusuri ng Aktibidad ng AntiosteoarthritisSa Vivo
2.4.1. Mga hayop
Ang mga lalaking daga ng Sprague-Dawley (7 linggong gulang) ay binili mula sa Samtako Inc. (Osan, Korea) at inilagay sa ilalim ng mga kontroladong kondisyon na may 12-h light/dark cycle sa°C at% halumigmig. Binigyan ng laboratory diet at tubig ang mga dagaad libitum. Ang lahat ng mga eksperimentong pamamaraan ay isinagawa bilang pagsunod sa mga alituntunin ng National Institutes of Health (NIH) at inaprubahan ng Animal Care and Use Committee ng unibersidad ng Daejeon (Daejeon, republika ng Korea).
2.4.2. Induction ng OA na may MIA sa Rats
Ang mga hayop ay randomized at itinalaga sa mga grupo ng paggamot bago ang pagsisimula ng pag-aaral (bawat pangkat). MIA solution (3 mg/50μL ng 0.9% saline) ay direktang iniksyon sa intra-articular space ng kanang tuhod sa ilalim ng anesthesia na sapilitan na may pinaghalong ketamine at xylazine. Ang mga daga ay sapalarang hinati sa apat na grupo: (1) ang saline group na walang MIA injection, (2) ang MIA group na may MIA injection, (3) ang SDE-treated group (200 mg/kg) na may MIA injection, at (4). ) ang indomethacin- (IM-) na ginagamot na grupo (2 mg/kg) na may MIA injection. Ang mga daga ay pinangangasiwaan nang pasalita kasama ang SDE at IM 1 linggo bago ang MIA injection sa loob ng 4 na linggo. Ang dosis ng SDE at IM na ginamit sa pag-aaral na ito ay batay sa mga ginamit sa mga nakaraang pag-aaral [10,13,14].
2.4.3. Mga Pagsukat ng Hindpaw Weight-Bearing Distribution
Pagkatapos ng OA induction, ang orihinal na balanse sa weight-bearing capability ng hindpaws ay nagambala. Ang isang incapacitance tester (Linton instrumentation, Norfolk, UK) ay ginamit upang suriin ang mga pagbabago sa pagpapaubaya sa timbang. Ang mga daga ay maingat na inilagay sa silid ng pagsukat. Ang puwersang nagdadala ng timbang na ginawa ng hind limb ay na-average sa loob ng 3 s na panahon. Ang ratio ng pamamahagi ng timbang ay kinakalkula ng sumusunod na equation: [timbang sa kanang hind limb/(weight on right hind limb + weight sa left hind limb)] × 100 [15].
2.4.4. Mga Pagsukat ng Mga Antas ng Serum Cytokine
Ang mga sample ng dugo ay na-centrifuge sa 1,500 g para sa 10 min sa 4 ° C; pagkatapos ay ang serum ay nakolekta at naka-imbak sa −70 ° C hanggang sa gamitin. Ang mga antas ng IL-1β, IL-6, TNF-α, at PGE2 sa serum ay sinusukat gamit ang ELISA kit mula sa R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) ayon sa mga tagubilin ng tagagawa.
2.4.5. Real-Time Quantitative RT-PCR Analysis
Ang kabuuang RNA ay nakuha mula sa tissue ng joint ng tuhod gamit ang TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), reverse-transcribed sa cDNA at PCR-amplified gamit ang isang TM One Step RT PCR kit na may SYBR green (Applied Biosystems). , Grand Island, NY, USA). Ang real-time na quantitative PCR ay isinagawa gamit ang Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR system (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Ang mga primer sequence at ang probe-sequence ay ipinapakita sa Table1. Ang mga Aliquot ng sample na cDNA at isang pantay na halaga ng GAPDH cDNA ay pinalaki ng TaqMan® Universal PCR master mixture na naglalaman ng DNA polymerase ayon sa mga tagubilin ng tagagawa (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). Ang mga kondisyon ng PCR ay 2 min sa 50 ° C, 10 min sa 94 ° C, 15 s sa 95 ° C, at 1 min sa 60 ° C para sa 40 cycle. Natukoy ang konsentrasyon ng target na gene gamit ang comparative Ct (threshold cycle number sa cross-point sa pagitan ng amplification plot at threshold) na paraan, ayon sa mga tagubilin ng tagagawa.
Ang Osteoarthritis (OA) ay ang pinakamadalas na musculoskeletal disorder at ang pinakakaraniwang degenerative joint disease sa mga matatanda.1]. Ang OA ay isang kondisyong dulot ng pinsala, pagkawala ng istraktura at paggana ng cartilage, at dysregulation ng proinflammatory at anti-inflammatory pathways [2,3]. Pangunahing nakakaapekto ito sa articular cartilage at subchondral bone ng synovial joints at nagreresulta sa joint failure, na humahantong sa pananakit sa pagdadala ng timbang kabilang ang paglalakad at pagtayo.4].
Walang lunas para sa OA, dahil napakahirap ibalik ang kartilago kapag ito ay nawasak [5]. Ang mga layunin ng paggamot ay upang mapawi ang sakit, mapanatili o mapabuti ang kadaliang mapakilos ng magkasanib na bahagi, dagdagan ang lakas ng mga kasukasuan, at bawasan ang mga epekto ng hindi pagpapagana ng sakit. Ang mga pharmacological na paggamot ng OA ay naglalayong bawasan ang sakit upang mapataas ang magkasanib na paggana at kalidad ng buhay ng pasyente. Bagaman ang pagkasira ng cartilage ay ang pangunahing kaganapan sa OA, ang pagkasira ng collagen ay ang pangunahing pangyayari na tumutukoy sa hindi maibabalik na pag-unlad ng OA na may kaugnayan sa pamamaga [6,7]. Ang mga paggamot na may aktibidad na anti-namumula at chondroprotective ay inaasahang magpapawi ng sakit at mapanatili ang integridad ng matrix sa mga pasyenteng OA.
Samakatuwid, ang pagpapababa ng pamamaga ay malamang na maging kapaki-pakinabang sa pamamahala ng OA. Ang mga kamakailang pag-aaral ay nagmumungkahi ng mga proteksiyon na tungkulin para sa mga mapagkukunang herbal sa pag-unlad ng OA, sa mga tuntunin ng pagpapagaan ng pamamaga ng chondrocyte at karagdagang pagkasira ng kartilago, sa pamamagitan ng kanilang kakayahang makipag-ugnayan sa mga tisyu na nauugnay sa magkasanib na bahagi, na nagreresulta sa pagpapagaan ng pananakit ng kasukasuan.8].
Ang ugat ngSaposhnikovia divaricataAng Schischkin (Umbelliferae) ay malawakang ginagamit sa tradisyunal na gamot para sa paggamot ng sakit ng ulo, pananakit, pamamaga, at arthritis sa Korea at China [9,10]. Ang magkakaibang epekto ng parmasyutiko ngSaposhnikovia divaricataKasama rin sa (SD) ang mga anti-inflammatory, analgesic, antipyretic, at antiarthritic properties [9,11]. Ang isang kamakailang pag-aaral ay nagpakita na ang SD chromone extract ay nagtataglay ng potensyal na antirheumatoid arthritis effect sa isang mouse model ng collagen-induced arthritis [10]; gayunpaman, ilang mga pag-aaral ang isinagawa upang suportahan ang aktibidad na anti-namumula at antiarthritis ngSaposhnikovia divaricatakatas (SDE).
Samakatuwid, ang kasalukuyang pag-aaral ay nag-imbestiga sa mga aktibidad na anti-namumula at antiosteoarthritis ng isang 70% ethanol extract ng SD. Una, nasuri ang anti-inflammatory effect ng SDEsa vitrosa LPS-induced RAW 264.7 cells. Susunod, ang antiosteoarthritis na epekto ng SDE ay sinusukat sa pamamagitan ng pagtatasa ng pamamahagi ng timbang, pagkasira ng articular cartilage, at mga nagpapasiklab na tugon sa isang modelo ng daga ng monosodium iodoacetate- (MIA-) na sapilitan na OA.